分子量測(cè)定
> 技術(shù)簡(jiǎn)介
鑒定蛋白質(zhì)的大小和純度最簡(jiǎn)單的辦法莫過于通過SDS-PAGE,但是SDS-PAGE只能測(cè)定蛋白質(zhì)表觀分子量,對(duì)于蛋白質(zhì)精確分子量的測(cè)定,只能通過MALDI-TOF質(zhì)譜法。該方法將蛋白質(zhì)分子離子化后通過質(zhì)量分析器對(duì)其質(zhì)荷比進(jìn)行分析,或進(jìn)一步通過算法得到樣品的精確分子量。
> 技術(shù)原理
MALDI-TOF/TOF主要由兩部分組成:基質(zhì)輔助激光解吸電離離子源(MALDI)和飛行時(shí)間質(zhì)量分析器(TOF)。MALDI技術(shù)是將樣品均勻包埋在基質(zhì)中,基質(zhì)吸收激光提供的能量而蒸發(fā),攜帶部分樣品分子進(jìn)入氣相,并將一部分能量傳遞給樣品分子使其離子化。TOF的原理是離子在電場(chǎng)作用下加速通過飛行管道,根據(jù)到達(dá)檢測(cè)器的飛行時(shí)間不同先后被檢測(cè),即測(cè)定離子的質(zhì)荷比(m/z)與離子的飛行時(shí)間成正比。
> 技術(shù)優(yōu)勢(shì)
可用于大規(guī)模數(shù)量樣本檢測(cè);
不受樣本分子量大小的限制;
高靈敏度、高準(zhǔn)確性
> 應(yīng)用領(lǐng)域
蛋白分子量測(cè)定
> 技術(shù)路線
> 實(shí)驗(yàn)儀器
5800 MALDI TOF/TOF™(AB SCIEX)
> 數(shù)據(jù)分析
蛋白分子量測(cè)定結(jié)果
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